紫外可見分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)主要是由電源、光源、單色器、樣品室、光電轉(zhuǎn)換器、前置放大器、數(shù)據(jù)處理、外圍設(shè)備等部分組成。
光 源:指的是發(fā)光的物體。理想的光源應(yīng)能提供連續(xù)輻射,光的強(qiáng)度必須足夠大,并且在整個光譜區(qū)內(nèi)其強(qiáng)度不應(yīng)隨波長有明顯變化。當(dāng)然理想的光源是不存在的,沒有那種光源能在所有波長點(diǎn)提供足夠強(qiáng)大而且穩(wěn)定的光輻射。所以根據(jù)不同的波長,要采用不同的光源。
鎢燈:320-1100nm(可見區(qū))
氘燈:190- 400nm(紫外區(qū))
單 色器:是一種用來把來自光源的混合光分解為單色光并能隨意改變波長的裝置。它主要有入射狹縫、出射狹縫、色散元件和準(zhǔn)直鏡組成,其中色散元件是最關(guān)鍵的,因?yàn)樗馁|(zhì)量決定了單色器質(zhì)量的優(yōu)劣。
試 樣室:用來擱放測試樣品的一個暗盒裝置。
光電轉(zhuǎn)換器:把微弱的光信號轉(zhuǎn)變成微弱的電信號。能檢測通過測試溶液與參比溶液的光強(qiáng)度,并以電信號顯示出來,用于體現(xiàn)測試溶液與參比溶液的光強(qiáng)度比值。通常紫外可見分光光度計(jì)使用的檢測器有硅光電池、光電管和光電倍增管,今天由于半導(dǎo)體技術(shù)的迅速發(fā)展,光電池的性能越來越好,且光電倍增管的價(jià)格越來越低,所以光電管逐漸被淘汰了。
前置放大器:一般由高阻抗集成運(yùn)算放大器組成,完成微電流(電壓)的放大。
直流穩(wěn)壓電源:組成不同電壓(電流)的直流工作電源,滿足儀器各個負(fù)載需求。
顯 示器:LED、LCD電壓表組成。
分光光度計(jì)的理論依據(jù)是建立在光的吸收定律上的。光的吸收定律又稱:朗伯-比爾定律。
就是利用物質(zhì)在光的照射激發(fā)下,具有選擇性吸收現(xiàn)象來對物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。
I0:入射的單色光強(qiáng)度
T =I/I0×100% I:出射的單色光強(qiáng)度
T:透射比強(qiáng)度(透光率),用百分?jǐn)?shù)表示。
朗伯-比耳定律:A=KCL A=log1/T = -log T
A:吸光度(吸收比強(qiáng)度)
K:吸光系數(shù)
C:樣品的濃度(g/l)
L:比色皿的寬度(cm)
吸光度:當(dāng)一束平行的單色光,垂直照射在均勻的被測樣品時,該樣品就有一定的吸收,樣品對入射光減弱吸收的程度,稱為吸光度,通過儀器便可測出,吸光度是沒單位的一個量。從以上公式中可以看出,當(dāng)入射光強(qiáng)度一定時,物質(zhì)的吸光度與物質(zhì)中吸光物質(zhì)的濃度和物質(zhì)厚度的乘積成正比。
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