預(yù)混合飼料中維生素A乙酸酯、維生素D3、維生素E的測(cè)定 ——液相色譜法 本方法適用于配合飼料、濃縮飼料、復(fù)合預(yù)混料飼料、維生素預(yù)混合飼料維生素A及維生素D、維生素E的測(cè)定。參考標(biāo)準(zhǔn)GB/T17817-2010《飼料中維生素A的測(cè)定高效液相色譜法》、 GB/T 17818-2010 《飼料中維生素D3的測(cè)定高效液相色譜法》、GB/T 17812-2008 《飼料中維生素E的測(cè)定高效液相色譜法》。
1、方法原理 維生素預(yù)混料中的維生素A乙酸酯、維生素D3、維生素E(dl-α-生育酚乙酸酯)用甲醇溶液提取,試液注入高效液相色譜柱,用紫外檢測(cè)器在275 nm處測(cè)定,外標(biāo)法計(jì)算維生素A、維生素D3、維生素E(dl-α-生育酚乙酸酯)含量。
2、主要儀器設(shè)備 1)液相色譜儀L210,帶紫外檢測(cè)器(上海儀電分析儀器有限公司);
2)超聲波水??;
3)電子天平;
4)真空抽濾裝置。
3、實(shí)驗(yàn)方法
1、混合標(biāo)樣配置 維生素A乙酸酯、維生素D3、維生素E(dl-α-生育酚乙酸酯)標(biāo)準(zhǔn)貯備液:準(zhǔn)確稱(chēng)取維生素A乙酸酯、維生素D3、維生素E (dl-α-生育酚乙酸酯)各10.0 mg,置于100 mL棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀釋到刻度,混勻,4℃下保存。該貯備液濃度為0.1 mg/mL。 維生素A乙酸酯、維生素D3、維生素E(dl-α-生育酚乙酸酯)混合標(biāo)準(zhǔn)工作液:準(zhǔn)確吸取各標(biāo)準(zhǔn)貯備液若干毫升于10 mL棕色容量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,混勻。
2、試樣溶液的制備 稱(chēng)取試樣1.00 g置于100 mL棕色容量瓶中,加入約80 mL甲醇,于 65 ℃超聲波水浴中超聲提取30 min,冷卻至室溫,用甲醇稀釋至刻度,充分搖勻后過(guò)0.45 μm濾膜過(guò)濾。將試樣溶液進(jìn)一步稀釋至合適濃度,用于實(shí)驗(yàn)分析。
3、液相色譜儀參考條件 色譜柱:C18 4.6 mm(i.d)×150mm; 流動(dòng)相:95%甲醇 流速:1 mL/min; 柱溫:室溫 波長(zhǎng):275 nm; 測(cè)定:取相同體積試樣制備液和標(biāo)準(zhǔn)使用液分別注入高效液相色譜儀,根據(jù)保留時(shí)間按定性,外標(biāo)峰面積法定量。
4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 4.1 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液高效液相色譜圖 液相色譜儀 4.2工作曲線(xiàn)的繪制 液相色譜儀 維生素D3工作曲線(xiàn)見(jiàn)下圖,線(xiàn)性相關(guān)系數(shù):0.9998 液相色譜儀 4.3預(yù)混料實(shí)際樣品色譜圖 液相色譜儀
本文鏈接:http://www.4diz.com/view/718.html
本文關(guān)鍵詞:上海儀電,儀電分析,液相色譜儀